小鼠骨髓瘤细胞提取:小鼠骨髓巨噬细胞提取

时间:2023-12-24 17:19:18/人气:403 ℃

小鼠骨髓巨噬细胞提取。

·安乐死处死小鼠后酒精浸泡5min。

·沿小鼠踝关节环形剪开皮肤,从踝关节处向上分离皮肤至大转子,背侧同上,向上分离皮肤至大转子。

·充分暴露大腿和小腿(此处注意保留全部肌肉),充分剔除周围血管、筋膜等。

·找到髋关节,于髋关节上剪断,于踝关节之下剪断,注意保留踝关节、膝关节和髋关节。

·秒取材后置于盛满酒精的培养血中浸泡15秒,后转至泡满DMEM的培养基中室温保存。

·小心剔除胫骨和股骨周围的肌肉(注意不可折断关节处),剪去胫骨和股骨两端。

·用盛有DMEM的注射器冲洗出细胞,反复多次直到培养基澄清。

·收集培养液,70um筛网过滤后600g,4°C,离心5min。

·弃上清,加入1毫升裂红液,室温下孵育3min。

·后加入10mlDMEM终止裂红600g,离心5min。

·后加入8毫升DMEM送入恒温箱孵育。

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